Les pipettes sont un type d'équipement de laboratoire utilisé pour mesurer et transférer de très petits volumes de liquide. La précision et la précision de la mesure de la pipette sont nécessaires car toute divergence dans les volumes distribués peut affecter les résultats d'une expérience. Pour assurer la précision, il est nécessaire de vérifier l'étalonnage de la pipette tous les quelques mois. Le processus d'étalonnage permet de vérifier si l'équipement distribue ou non les volumes appropriés afin de pouvoir le réparer s'il ne l'est pas.

Première partie de deux:
Vérification de l'étalonnage

  1. 1 Rassemblez les matériaux nécessaires. Pour vérifier l'étalonnage d'une pipette, vous aurez besoin de la pipette, des embouts de pipette, de l'eau distillée, d'un bécher, d'un thermomètre, d'une balance et du poids des bateaux. La balance doit être spécifique aux microgrammes pour calibrer les micropipettes avec un maximum de 1 µL.[1]
    • Vous n'aurez pas besoin de plus de 5 ml d'eau. Remplissez le bécher d'eau.
    • Assurez-vous que les pointes de pipette sont les pointes correctes qui s’adaptent correctement à la pipette.
  2. 2 Mesurer la température de l'eau distillée. Placez le thermomètre dans l'eau et laissez-le au moins une minute. Si la ligne rouge du thermomètre est toujours en mouvement, laissez-la pendant une minute. Après une minute, enregistrez la température dans un cahier. Retirez le thermomètre et séchez-le lorsque vous avez terminé.[2]
    • Connaître la température de l'eau est important pour les calculs qui seront effectués pour vérifier l'étalonnage.
  3. 3 Placez le bateau de pesée sur la balance et mettez-le à zéro. Idéalement, vous utiliserez une balance avec des portes et une chambre isolée. Placez le bateau de pesée dans la chambre et fermez les portes. Si vous n'avez pas de porte, placez simplement le bateau à pesée sur la balance. Appuyez sur le bouton «Zéro» ou «Tare» et attendez que la balance affiche zéro.[3]
    • La remise à zéro de la balance soustrait le poids du bateau en plastique et vous permet de mesurer uniquement le poids de tout ce que vous mettez dans le bateau.
  4. 4 Préparez la pipette pour l'étalonnage. Essuyez la pipette avec de l'éthanol pour tuer tous les contaminants avant de commencer et assurez-vous que rien ne bouche l'obstruction de la pipette. Placez l'extrémité appropriée à la fin et définissez le volume à tester.[4]
    • Pour l'étalonnage, testez le plus petit volume et le plus grand volume que la pipette peut distribuer.[5]
  5. 5 Pré-rincer la pointe avant l'étalonnage. Appuyez sur le bouton jusqu'à la première butée et collez la pointe dans l'eau distillée pour qu'environ 2 mm soient immergés dans le liquide. Relâchez le bouton pour aspirer un peu de liquide puis distribuez à nouveau le liquide en appuyant sur le bouton. Répétez cette opération trois fois pour pré-rincer la pointe.[6]
    • Appuyez sur le bouton jusqu'au deuxième arrêt pour distribuer tout liquide restant dans l'embout et retirez la pipette de l'eau.
  6. 6 Aspirer le volume d'étalonnage. Avec la pointe hors du liquide, appuyez sur le bouton jusqu'au premier arrêt. Placez environ 2 mm de la pointe dans l'eau distillée et relâchez le bouton pour aspirer le liquide dans la pointe. Attendez environ 1 seconde avant de retirer le bout de l'eau.[7]
    • Assurez-vous que l'embout est complètement immergé pendant tout le processus d'aspiration. Vous ne voulez pas de bulles dans la pointe ou les résultats seront faux.
  7. 7 Distribuer le liquide dans le bateau de pesée sur la balance. Placez la pointe contre le fond du bateau de pesée et appuyez sur le bouton jusqu'au premier arrêt. Déplacez-vous à un autre endroit légèrement éloigné de l’eau et appuyez sur le bouton jusqu’au deuxième arrêt. Tout en maintenant le bouton enfoncé, soulevez la pointe du bateau de pesée.[8]
    • Gardez la pointe sur la pipette car vous l'utiliserez à nouveau pour peser plus de tests d'étalonnage. Assurez-vous que la pointe ne touche à rien.
  8. 8 Notez le poids sur la balance. Fermez la porte si vous utilisez un équilibre de chambre. Attendez que les chiffres cessent de changer. Notez ce numéro dans votre cahier.[9]
    • Il est important d'attendre que le nombre soit stabilisé avant de l'enregistrer. Vos lectures seront incorrectes si vous n'attendez pas.
  9. 9 Répétez ce processus pour prendre au moins 10 lectures. Remettez la balance à zéro, pré-rincez la pointe, aspirez le même volume, distribuez le volume, puis enregistrez le poids. Vous voulez avoir plusieurs enregistrements du même volume et vous pouvez ensuite les classer tous ensemble.[10]
    • Vous pouvez répéter ce même processus avec des volumes différents tant que vous effectuez plusieurs lectures par volume.

Deuxième partie de deux:
Calcul des résultats

  1. 1 Définissez la formule pour le volume calculé. La formule pour calculer le volume distribué par la pipette est V = w * Z où w est le poids de l'eau, Z est le facteur de conversion basé sur la densité de l'eau et V est le volume calculé de la quantité d'eau distribuée .
    • Vous pouvez trouver la variable Z en recherchant la densité de l'eau en utilisant la température enregistrée au début de l'expérience.[11]
    • Par exemple: si la température de l'eau était de 23 ° C, vous utiliseriez alors une valeur Z de 1,0035 µg / mg.
  2. 2 Moyenne des réplicats ensemble. Vous devriez avoir pesé le volume d'eau distribué par la pipette au moins 10 fois. Pour faire la moyenne de toutes ces valeurs, additionnez-les et divisez-les par 10. Si vous avez fait plus ou moins d'essais, additionnez chaque essai et divisez-le par le nombre total d'essais.
    • Par exemple: Les dix poids que vous avez enregistrés pour un volume de pipette de 10µL sont les suivants: 9.89, 10.01, 10.02, 9.99, 9.95, 10.04, 9.96, 10.01, 9.99 et 9.98.
    • La moyenne est la suivante: (9,89 + 10,01 + 10,02 + 9,99 + 9,95 + 10,04 + 9,96 + 10,01 + 9,99 + 9,98) / 10 = 99,84 / 10 = 9,984
  3. 3 Branchez les variables dans l'équation et résolvez. Une fois que vous avez déterminé les nombres appropriés à utiliser pour chaque variable, vous pouvez les brancher dans l’équation et résoudre le volume calculé. Pour résoudre, il suffit de multiplier le poids moyen de tous les essais par la valeur Z.
    • Par exemple: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10.019
  4. 4 Calculez la précision de la pipette. Pour calculer la précision, vous pouvez utiliser l'équation A = 100 x Vavg/ V0, où A est la précision de la pipette, Vavg est le volume moyen calculé et V0 est la valeur que vous définissez la pipette à distribuer. La précision devrait être comprise entre 99 et 101%.[12]
    • Si la pipette est correctement calibrée, la valeur calculée doit être très proche de la valeur réelle définie sur la pipette.
    • Par exemple: A = 100 x Vavg/ V0 = 100 x 10,019 / 10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
    • Cette pipette particulière est correctement calibrée.
  5. 5 Envoyez la pipette pour l'étalonnage si nécessaire. Si votre pipette ne réussit pas le test d'étalonnage, arrêtez de l'utiliser immédiatement pour des expériences. Les pipettes sont des pièces d'équipement de laboratoire très délicates et coûteuses. Vous ne pouvez pas réparer le calibrage vous-même, vous devrez donc les envoyer pour un entretien approprié. Par ailleurs, certaines entreprises viendront dans votre laboratoire et y calibreront vos pipettes.[13]
    • Contactez la société qui fabrique votre marque de pipette pour l'entretien.