Le cholestérol est un composé organique stéroïde et alcool naturel présent dans les membranes cellulaires, où il constitue un composant structurel essentiel des membranes et des fonctions des cellules de mammifères pour établir la perméabilité et la fluidité de la membrane. En outre, le cholestérol est un élément important de la synthèse des acides biliaires, des hormones stéroïdes et de plusieurs vitamines liposolubles. Il se trouve dans la moelle épinière, le cerveau et les tissus nerveux.[1]

La vésicule biliaire concentre la bile produite à partir du foie et les libère au besoin pour la digestion. La vésicule biliaire stocke également le cholestérol libre, qui peut précipiter pour former des calculs biliaires si sa concentration dans la bile dépasse un niveau critique. L'accumulation de calculs biliaires peut irriter la muqueuse de la vésicule biliaire, provoquant des douleurs, des nausées et des vomissements. Ils peuvent également bloquer les voies biliaires et entraîner des complications nécessitant une intervention chirurgicale (cholécystectomie) pour retirer la vésicule biliaire avec ses calculs biliaires. Les étapes suivantes vous aideront à isoler le cholestérol des calculs biliaires.

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  1. 1 Obtenir des calculs biliaires. Dans certains endroits, vous pouvez demander des calculs biliaires au département de chirurgie ou au département de pathologie des hôpitaux.
  2. 2 Placez les calculs biliaires entre des feuilles de papier[2]puis écrasez-les en martelant légèrement.
  3. 3 Stériliser les calculs biliaires en les lavant avec un javellisant domestique (solution d'hypochlorite de sodium à 5%).
  4. 4 Peser les calculs biliaires écrasés. Enregistrez le poids. Cela sera important pour estimer la quantité de solvant à utiliser.
  5. 5 Ajouter les calculs biliaires broyés à un récipient à réaction.
  6. 6 Ajouter du 2-butanone (méthyléthylcétone), environ 10 cc par gramme de calculs biliaires broyés, dans le récipient de réaction et chauffer doucement. Remuer doucement. La solution aura un aspect jaune sale à brun de la bilirubine.
  7. 7 Filtrer la solution chaude à travers un disque / cône de filtre en papier sur un entonnoir dans un autre récipient propre. Appliquer un léger vide dans le récipient récepteur pour faciliter la filtration. Rincer le récipient de cuisson avec une petite quantité de 2-butanone chaud et le transférer dans l'entonnoir. Le cholestérol sera complètement dissous dans le solvant à base de 2-butanone, tandis que les impuretés insolubles (principalement composées de bilirubine, un métabolite de l'hémoglobine, qui donne une couleur brune aux calculs biliaires) seront éliminées.
    • Si le filtrat reste très coloré, ajouter du charbon actif et filtrer à nouveau.
  8. 8 Ajouter du méthanol (attention: "alcool de bois" extrêmement toxique au filtrat, environ 5 cm3 par gramme de calculs biliaires de départ.
  9. 9 Réchauffer le filtrat à ébullition douce, puis ajouter de l'eau goutte à goutte jusqu'à l'apparition d'un léger trouble. Le cholestérol est très soluble dans la 2-butanone, moins soluble dans le méthanol et insoluble dans l'eau. L'ajout de l'eau en tant que précipitant dans la solution aidera à saturer la solution en cholestérol pour la cristallisation. Le méthanol est nécessaire pour combler les solvants, car la 2-butanone et l'eau ne sont pas très miscibles entre elles, et le méthanol est miscible à la fois à l'eau et à la 2-butanone.
  10. 10 Retirez soigneusement la solution du feu. Enveloppez le rembourrage en coton ou le tissu-éponge autour du contenant chaud pour que l'isolation permette un refroidissement lent, puis laissez-le refroidir à la température ambiante.
  11. 11 Une fois à la température ambiante, déballer et refroidir le récipient dans de la glace pour permettre à plus de cholestérol de cristalliser hors de la solution.
  12. 12 Recueillir le cholestérol par filtration. Le rendement est de grandes plaques cristallines incolores et des aiguilles de cholestérol, environ 75% des calculs biliaires de départ. Conservez le filtrat. Si un plus grand rendement est souhaité, vous pouvez obtenir une deuxième récolte moins pure en faisant bouillir le filtrat, en ajoutant goutte à goutte de l'eau et en répétant le processus de cristallisation.